根据中华农业科技奖奖励办要求，申报成果前3完成人需在所在单位进行公示，本公司对拟推荐报奖项目的予以公示如下：

项目名称：防治水稻细菌性病害微生物杀菌剂“叶斑宁”的创制与应用

主要完成人：刘永锋、张荣胜、孙以文等

成果简介：

 水稻细菌性病害（白叶枯病和条斑病）在我国各稻区均有发生，特别是在籼稻、杂交稻产区发病严重，甚至造成绝收，严重的威胁着我国的粮食安全。生产上主要依赖噻枯唑防治，该药剂防效仅50～60%，且易光解产生具有毒副作用的物质，影响稻米品质和农田环境；同时，稻田综合种养等新栽培方式也急需研发绿色防控水稻细菌性病害的技术产品。本项目基于优质稻米产业的发展需求，针对芽孢杆菌微生物杀菌剂产品效价低、货架期短的技术瓶颈和细菌性病害绿色防控技术产品缺乏的共性问题，经过十多年的研究，成功创制了“60亿芽胞/毫升解淀粉芽胞杆菌Lx-11”微生物杀菌剂（叶斑宁），突破了应用活体芽孢杆菌防控水稻细菌性病害的空白，在生产生大面积防控水稻细菌性病害，并取得如下创新成果：

1、制定了“定向筛选三评价”的快速科学筛选生防芽胞杆菌的评价体系，建立了病害生防芽胞杆菌资源库，成功筛选获得了对水稻细菌性病害有高效防控作用的解淀粉芽胞杆菌生防菌株Lx-11，为研发防治水稻细菌性病害的微生物杀菌剂提供了一株宝贵的高活性生防菌株。

制定了“定向筛选三评价”的快速科学筛选生防芽胞杆菌的评价体系，即采用专用选择性培养基（YPGA），建立了快速科学定向筛选芽孢杆菌，通过特性评价、分子评价和田间评价的技术体系，快速定向分离了1万余株芽胞杆菌，通过平板测定，抗菌谱、生物酶类活性检测，获得336株高效生防芽胞杆菌；结合抗菌物质合成基因检测测定了对水稻细菌病害防效，成功获得了对水稻细菌性病害具有显著防效的解淀粉芽胞杆菌Lx-11；全基因组测序结果揭示Lx-11含有8个编码抗菌物质的基因簇和多个与生防相关的基因，显示Lx-11是一株具有优良生防相关遗传基础的生防菌株；田间小区试验显示Lx-11对水稻细菌性病害具有优良生防潜力，为研发防治水稻细菌性病害的微生物杀菌剂提供了宝贵的菌株资源。

2、研究明确了Lx-11可分泌多种抗生物质且高产表面活性素（Surfactin），阐明了Surfactin是防治水稻细菌性病害的关键分泌物；本研究为研发以Lx-11为核心的微生物农药的研发提供了重要科学依据。

阐明了Lx-11的抑菌机制。研究发现Lx-11合成了Surfactin、Bacillomycin D和Fengycin等脂肽类抗生素，含量分别达到75.3mg/L、19.2mg/L和4.6mg/L，且高产Surfactin；敲除了表面活性素合成基因后，发现突变菌株Lx-11ΔsrfA对水稻细菌性条斑病的防效下降了40.3%，显示Surfactin是防治水稻细菌性病害的关键物质；同时，Lx-11可显著诱导水稻植株防卫反应基因超量表达、抗氧化酶活性显著提高，喷施Lx-11后叶片中PR4、PAL、LOX和POX的表达量分别是对照的6.0倍、10.7倍、1.6倍和14.8倍；抗氧化酶系POD、SOD和CAT活性分别提高了166.6%、60.0%和87.5%；Lx-11抑菌机制的研究，为该菌株的产业化应用提供了关键科学依据。

3、针对lx-11的生物学特性，构建了其高密度发酵技术，发酵产物表面活性素提高了37.7%；组建了Lx-11干悬浮剂的加工工艺，筛选了获得有效降低Lx-11表面张力的专用助剂，成功研发了微生物杀菌剂“叶斑宁”，产品货架期延长了12个月，效价显著提高。

针对lx-11的生物学特性，明确了温度、接种量和通气量为高密度发酵的关键因子，采用响应曲面法优化后，Lx-11发酵液含菌量和抑菌活性与常规发酵相比提高了184%和30.2%；表面活性素提高了103.7mg/L，效价显著提高，含量比最初发酵增长了37.7%；成功研发了Lx-11干悬浮剂环保剂型，明确了进风温度、热风流量、进样速率3个重要技术参数，获得产品与水剂相比，货架期延长了12个月，表面活性素提高了470.3mg/Kg，是初始发酵的6.25倍，产品效价显著提高；成功筛选了表面活性剂IV，明确其使用比例为1%；建立了Lx-11从商品化生产关键技术标准，突破了生物农药产品效价不高、货架期短的技术瓶颈，成功研发了微生物杀菌剂“叶斑宁”。

4、组建了“叶斑宁”使用技术规程，探明了田间喷雾方式、工作压力和药液流速，明确了“叶斑宁”田间使用最适时期、浓度和间隔期，建立了“叶斑宁”防治水稻细菌性病害的田间高效使用技术体系，为“叶斑宁”绿色防控水稻细菌性病害提供了关键技术支撑。

组建了“叶斑宁”使用技术规程：选择弥雾机喷头下倾45^o角喷雾，最适喷施期为发病初期、最低使用浓度为10⁷cfu/mL、间隔期为10天，防效可达到70%以上。微生物杀菌剂“叶斑宁”在2017年获得农药登记证，是全球第一个以解淀粉芽胞杆菌为有效成分登记防治水稻条斑病和白叶枯病的生物农药，填补了国内外应用微生物活体菌剂防治水稻细菌性病害的空白。“叶斑宁”在江苏、安徽、上海、湖北、云南等省市大面积使用。2019年起，该产品已列入江苏省绿色防控技术产品联合推荐名录，在稻田综合种养、绿色稻米生产园区对噻枯唑替代率达到100%。

公示时间截止2020年12月30日。公示期内，如需进一步了解情况，可向公司综合办公室了解；如有异议，请在2020年12月30日17：00前，以口头或书面形式向江苏省农科院科研处或纪委监察室反映。反映情况要实事求是、具体真实，署真实姓名，以便调查核实。

   江苏省苏科农化有限责任公司

                                                                                                                                                            2020年12月24日